游離氨基酸是動物體內重要的代謝物小分子,特定種類或者多種氨基酸濃度變化對于動物機體營養和健康狀態評估具有重要意義。目前,游離氨基酸的檢測主要通過液相色譜儀、氨基酸分析儀等儀器來實現,儀器設備昂貴,需要對氨基酸進行衍生化處理,且難以實現動態監測。近年來,生物傳感器的研制獲得了快速發展,可植入式和可穿戴式生物傳感器的研發成為前沿熱點。針對氨基酸檢測的生物傳感器也得到了發展,但存在穩定性不強和生物相容性問題待改善等問題。多肽適配體(肽適體)生物傳感器的構建是有望逐步解決這些問題的途徑之一。
中國科學院亞熱帶農業生態研究所農牧復合生態研究與畜禽健康養殖研究中心利用生物信息學技術,通過搜集豬、人、小鼠以及大鼠的氨基酸代謝相關蛋白29185條,形成氨基酸代謝相關蛋白庫;依據庫中蛋白一級序列獲得含約285萬種八肽的肽庫;采用AOTODOCK軟件在規模計算平臺上對和20種氨基酸有特異結合力的多肽進行初步篩選,獲得具有單一氨基酸特異結合性的八肽653條,平均每種氨基酸33條。隨后,使用等溫滴定量熱儀(Isothermal titration calorimeter)對多肽與氨基酸模擬結合的效果進行驗證,獲得了具有特異性氨基酸識別能力的肽適體。使用通過驗證的肽適體(以特異性識別精氨酸的肽適體為例)進行電化學阻抗型傳感器的構建,對氨基酸進行檢測發現,在0.1pM-0.1μM范圍內,構建的生物傳感器與精氨酸濃度具有良好的線性,y=704.5log(c) 11329.0, (R2=0.9925),在血清樣品的檢測中也得到了良好的效果。
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