產(chǎn)品詳情
Western Blot檢測(cè)技術(shù)服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟概述
1. 組織取材：組織塊稱重
2. 利用液氮、研缽粉碎組織塊
3. 加入RIPA緩沖液（每克組織3 ml RIPA），PMSF（每克組織30μl，10 mg/ml PMSF），利用Polytron進(jìn)一步勻漿（15,000轉(zhuǎn)/分*1分鐘）維持4℃
4. 加入PMSF（每克組織30μl，10 mg/ml PMSF），冰上孵育30分鐘
5. 移入離心管4℃ 約20,000 g（約15,000轉(zhuǎn)）15分鐘
6. 上清液為細(xì)胞裂解液可分裝-20℃保存
7. 進(jìn)行Bradford比色法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度
8. 取相同質(zhì)量的細(xì)胞裂解液（體積*蛋白質(zhì)濃度），并加等體積的2×電泳加樣緩沖液
9. 沸水浴中3分鐘
10. 上樣
11. 電泳（濃縮膠20mA，分離膠35mA）
12. 電轉(zhuǎn)膜儀轉(zhuǎn)膜（100mA 40分鐘）
13. 膜用麗春紅染色，膠用考馬斯亮藍(lán)染色
14. Westernblot 試劑盒顯色
15. 分析比較記錄
Western Blot檢測(cè)技術(shù)服務(wù)產(chǎn)品詳細(xì)資料盡在http://www.hlk-bio.com/
商鋪地址http://www.chem17.com/st297103/
1. 組織取材：組織塊稱重
2. 利用液氮、研缽粉碎組織塊
3. 加入RIPA緩沖液（每克組織3 ml RIPA），PMSF（每克組織30μl，10 mg/ml PMSF），利用Polytron進(jìn)一步勻漿（15,000轉(zhuǎn)/分*1分鐘）維持4℃
4. 加入PMSF（每克組織30μl，10 mg/ml PMSF），冰上孵育30分鐘
5. 移入離心管4℃ 約20,000 g（約15,000轉(zhuǎn)）15分鐘
6. 上清液為細(xì)胞裂解液可分裝-20℃保存
7. 進(jìn)行Bradford比色法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度
8. 取相同質(zhì)量的細(xì)胞裂解液（體積*蛋白質(zhì)濃度），并加等體積的2×電泳加樣緩沖液
9. 沸水浴中3分鐘
10. 上樣
11. 電泳（濃縮膠20mA，分離膠35mA）
12. 電轉(zhuǎn)膜儀轉(zhuǎn)膜（100mA 40分鐘）
13. 膜用麗春紅染色，膠用考馬斯亮藍(lán)染色
14. Westernblot 試劑盒顯色
15. 分析比較記錄
Western Blot檢測(cè)技術(shù)服務(wù)產(chǎn)品詳細(xì)資料盡在http://www.hlk-bio.com/
商鋪地址http://www.chem17.com/st297103/
